Современные технологии в микробиологической диагностике

Середина прошлого столетия ознаменовалась чрезвычайно важным событием-лекарственные средства пополнились новой группой антимикробных препаратов – антибиотиками, которыми вслед за людьми стали лечить и животных. Введением антибиотиков в повседневную ветеринарную практику, привело к снижению тяжести и летальности от многих бактериальных инфекций. Снизилась заболеваемость рожистыми воспалениями, стрептококковой, сальмонеллезной инфекцией. Затем появились анатоксины, иммунолобулины, ряд высококачественных вакцин, бактериофаги и наконец — пробиотики.

На фоне этих достижений многие ветеринарные врачи обрели уверенность, что в скором будущем проблема бактериальных инфекций исчезнет. После введения в практику широкого ассортимента этих препаратов владельцы животных получили доступ к их применению без врачебных рекомендаций. Да и врачи не всегда назначали адекватное лечение. Это привело к увеличению видов микроорганизмов – бактерий, утративших чувствительность к применяемому антибиотику, а так же увеличение спектра устойчивости к двум и более препаратам. В результате такие инфекции как колибактериоз, стафилококкоз, псевдомоноз, пастереллез оказались до сих пор не побежденными.

Бактериологическая лаборатория проводит исследование по диагностике свыше 40 заболеваний животных, птиц, пчел, рыб бактериальной этиологии; санитарно-зоогигиенические исследования смывов с оборудования животноводческих и птицеводческих предприятий, исследование спермы, молока, воды, кормов растительного и животного происхождения, кормовых добавок с целью сертификационных испытаний. При этом используются разнообразные методы диагностики: патологоанатомический, микроскопический, бактериологический (посев на питательные среды, выделение чистой бак. культуры, дифференциация и идентификация выделяемого микроба), серологический (РА, РП, РН, плазмокоагуляция, фаготипирование), биологический (заражение лабораторных животных: морских свинок, белых мышей, кроликов).

Дифференциация и идентификация возбудителей – определение родовой, видовой и типовой принадлежности микроорганизмов – наиболее ответственная часть микробиологического исследования. Оно осуществляется на основании изучения целого комплекса свойств: морфологических, тинкториальных, культуральных, биохимических, ферментативных, антигенных и биологических. Применяемые в настоящее время традиционные методы проведения бак. анализа не могут обеспечить необходимого его уровня в связи с трудоемкостью процесса приготовления дифференциально-диагностических сред, их многообразием, сложностью приобретения, дороговизной многих компонентов и большим расходом лабораторной посуды. Кроме того продолжительность исследования в течение 10-30 дней практически обесценивает его значимость для конкретного больного животного, либо для данной эпизоотической ситуации.

Приобретенный в конце 2011 года автоматический микробиологический анализатор Vitek 2 Compact (фирма bioMerieux- Франция) имеет несомненные преимущества перед традиционными методами исследования:

возможность одновременного проведения широкого ряда биохимических реакций, что позволяет осуществить идентификацию, как правило, в один этап;
значительное расширение спектра идентифицируемых микроорганизмов;
сокращение продолжительности исследования, материальных и трудовых затрат;
получение стандартных воспроизводимых результатов;
использование автоматизации при оценке результатов биохимических реакций;
ускоренные методы определения чувствительности к антибиотикам, при этом определяются минимальные ингибирующие концентрации (МИК) антибиотиков, которые выражаются в мг/л. и интерпретируются в виде категорий: «устойчив», «чувствителен», «умеренно — устойчив». Набор антибиотиков может быть откорректирован по желанию заказчика.

Использование компьютерной программы для автоматизированного считывания, позволяет учитывать результаты для большинства микроорганизмов через 6- 48 часов.

Так при исследовании 2 абортированных плодов (экспертиза №499/89-96 от. 24.02.12 г.) лабораторный анализ с помощью микробиологического анализатора был сделан через 7 час. 25 мин. С вероятностью 99% и достоверностью «отличная идентификация» результат исследования –Listeria monocytogenes. Классическим же методом – этот результат был достигнут через 10 дней.

При исследовании 2 проб молока от коров на скрытый мастит (экспертиза № 618/54-55 от 13.03.12 г.) лабораторный анализ с помощью микробиологического анализатора был сделан через 6 часов (идентификация) и через 9 часов (определение чувствительности к антибиотикам). С вероятностью 94%, и достоверностью «очень хорошая идентификация» – результат исследования – Staphylococcus epidermidis. Традиционным же методом этот результат был достигнут через 7 дней.

Но при всех достоинствах и преимуществах данного анализатора – есть и минусы:

при идентификации микроорганизмов необходимо работать только с чистой бак. культурой;
использование идентификационных карт изготавливаемых только фирмой производителем и их не большой срок годности.

Несмотря на то, что в настоящее время серьезной проблемой ветеринарной диагностики во всем мире является патология животных и птиц вирусной этиологии – сегодня вряд ли у кого возникают сомнения в необходимости модернизации микробиологической службы, внедрения современных методов исследования с автоматизацией отдельных этапов и использования компьютерных программ.